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品牌:鄭州樂(lè )業(yè)生物科技有限公司 | 貨號:BA3162
英文名:
別名:
儲存條件 : -20℃,12個(gè)月
規格:100T/500T
分子式 :
分子量 :
單位 : 盒
商品貨號: | 商品名稱(chēng): | 規格: | 基本售價(jià): | 選擇規格: |
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BA3162.100 | 酵母菌落PCR試劑盒(堿裂解法) | 100T | 130.00元 | |
BA3162.500 | 酵母菌落PCR試劑盒(堿裂解法) | 500T | 600.00元 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
酵母菌落PCR試劑盒(堿裂解法)是一種非常便捷的用于釀酒酵母、畢赤酵母等菌株在質(zhì)粒轉化后陽(yáng)性克隆菌落的PCR篩選和鑒定的試劑盒。本試劑盒提供了Yeast Lysis Buffer用于破壞酵母細胞壁,并提供了Yeast Colony PCR Mix (Red, 2×)用于進(jìn)行PCR擴增。Yeast Colony PCR Mix (Red, 2×)是含有紫紅色和黃色染料(電泳位置分別約2.5kb和10bp)的2倍濃度的PCR預混液,含有2× Taq DNA Polymerase、2× PCR Buffer、2× dNTP和2× Loading Buffer等,用戶(hù)只需加入酵母菌落裂解液、引物和水即可進(jìn)行PCR擴增,并且擴增完畢后可以直接上樣電泳。同時(shí)提供了Yeast Lysis Buffer在PCR反應前對酵母進(jìn)行有效預處理,可以充分釋放酵母DNA,能確保有效進(jìn)行酵母菌落PCR,從而大大縮短酵母轉化后陽(yáng)性克隆鑒定的時(shí)間,提高實(shí)驗效率。
酵母細胞的細胞壁主要成分為多糖(85%-90%)和蛋白質(zhì)(10%-15%),其中多糖是由甘露聚糖、β-葡聚糖和少量的幾丁質(zhì)等組成,處于細胞壁內層的β-葡聚糖與幾丁質(zhì)共價(jià)相連,起到細胞骨架的作用;而外層的甘露聚糖與中層蛋白質(zhì)中的絲氨酸或蘇氨酸以O-糖苷鍵相連接,形成的甘露糖蛋白覆蓋于細胞表面,給予酵母細胞一定的韌性。酵母細胞壁獨特的結構致使其DNA難以被簡(jiǎn)單的PCR加熱過(guò)程所釋放,導致很多將酵母直接作為模板進(jìn)行PCR檢測的試劑盒成功率都比較低。
本試劑盒使用非常便捷。本試劑盒中提供的Yeast Colony PCR Mix (Red, 2×)已經(jīng)含有所有的通用組分,用戶(hù)只需自備引物和水即可對酵母菌落進(jìn)行PCR擴增。它大大簡(jiǎn)化了PCR操作,使操作更加快捷,也減少了PCR操作過(guò)程中可能導致的污染;同時(shí)Yeast Colony PCR Mix (Red, 2×)中已經(jīng)包含了上樣緩沖液組分,PCR擴增結束后即可直接上樣電泳,無(wú)需添加上樣緩沖液。
本試劑盒中提供了雙色染料,便于電泳時(shí)觀(guān)察電泳進(jìn)程。本試劑盒中的Yeast Colony PCR Mix (Red, 2×)加入了紫紅色和黃色的電泳示蹤染料(整體呈現紅色),其在濃度為1%瓊脂糖膠中的遷移位置分別大約位于2.5kb和10bp處。PCR結束后可直接進(jìn)行電泳檢測,無(wú)需再添加上樣緩沖液。紫紅色和黃色示蹤染料不會(huì )影響對相應DNA 條帶的觀(guān)察和檢測。
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